Title
|
القای ریشه مویین در یک گیاه دارویی از طریق انتقال ژن rolC توسط باکتریAgrobacterium tumefaciens
|
Type of Research
|
Thesis
|
Keywords
|
ریشه مویین، انتقال ژن، ژن rolC، Agrobacterium
|
Abstract
|
کشت بافت گیاهان دارویی و مهندسی ژنتیک آن ها جهت تولید ماده موثره بیشتر و استخراج راحت تر داروها مورد توجه خاص محققین می باشد. T-DNA پلاسمید Riباکتری بیماریزای Agrobacterium rhizogenesحاوی ژنهای مختلف rolاست که عامل ایجاد ریشه های مویین در گیاه میزبان باکتری هستند.در این پژوهشاثر ژن rolCاین باکتری در القای ریشه مویین در چند گیاه دارویی بررسی شد. بدین منظور بذرگیاهان سنبل الطیب، پروانش، کاسنی و داتوره استریل شده و در شرایط in vitro کشت شدند. ریزنمونه های برگی این گیاهان از گیاهچه های استریل توسط باکتری Agrobacterium tumefaciens حامل وکتور pBI121-rolC (تحت پروموتور CaMV35S) تلقیح شدند. در ریزنمونه های گیاه سنبل الطیب بعد از 7 روز و در ریزنمونه های پروانش بعد از 9 روزریشه های مویین ظاهر شدند. مقایسه میزان رشد طولی و وزن این ریشه ها با کشت سه لاین از ریشه های القا شده گیاه سنبل الطیبو یک لاین شاهد از ریشه های حاصل از جوانه زنی بذر در محیط کشت مایع MS بیانگر افزایش 4/9 برابری رشد طولی و 4/4 برابری وزن ریشه های مویین نسبت به ریشه های معمولی بود. تراریختی ریشه های القا شده از ریزنمونه های برگی سنبل الطیب از طریق PCR و با استفاد از آغازگرهای اختصاصی ژن rolC تایید شدند. بررسی القای کالوس در ریزنمونه های برگی تلقیح شده با آگروباکتریوم در بین محیط های کشت مختلف نشان داد که محیط کشت MS حاوی 3 میلی گرم در لیتر 2,4-D و 1 میلی گرم در لیتر BAP بالاترین میانگین کالوس زایی (100%)را دارد. نتیجه این تحقیق علاوه بر ایجاد لاینی از گیاه سنبل الطیب با ریشه دهی سریعتر و بیشتر نشان داد که می توان از ژن rolC برای القای ریشه در گیاهان دارویی استفاده کرد.
|
Researchers
|
Amin Sahandi (Student)، Maghsoud Pazhouhandeh (Primary Advisor)، Hanieh Mohajjel Shoja (Advisor)
|