Title
|
جداسازی، همسانه سازی و بررسی ویژگی های ژن انتقال دهنده هگزوز 7
(HXT7) از مخمر ساکارومایسس سرویزیه سویه ایرانی
|
Type of Research
|
Article
|
Keywords
|
همسانه سازی ، ساکارومیسس سرویزیه، ژن HXT7، پلاسمید نوترکیب
|
Abstract
|
امروزه مخمر ساکارومایسس سروزیه به عنوان میکروارگانیسم برتر برای تولید اتانول شناخته شده است و از طریق تخمیر الکلی باعث تولید اتانول می شود. این به دلیل کارایی بالای این موجود در جذب و تخمیر قندهای هگزوز می باشد. مخمر ساکارومایسس سرویزیه دارای 20 ژن کدکننده ی پروتئین های انتقال دهنده ی هگزوز شامل HXT1-HXT17، GAL2، SNF3 و RGT2 می باشد. در این تحقیق جداسازی ژن HXT7 با پرایمرهای اختصاصی ژن از طریق PCR از مخمر نان سویه ی ایرانی انجام شد و با انجام لیگاسیون قطعه ی تکثیر یافته به پلاسمید pGEM T کلون شد و به باکتری E. coli ترانسفرم گردید و در ادامه این توالی به وکتور بیانی pGBKT7 کلون گردید. در نهایت برای تایید نهایی قطعات کلون شده در پلاسمیدهای نوترکیب به توالی یابی فرستاده شدند. نتایج حاصله توسط نرم افزار BLAST و Multialign با توالی موجود در بانک اطلاعاتی NCBI مقایسه شد. نتایج حاصله نشان از تشابه بسیار زیاد ژن HXT7 جداسازی شده از مخمر ساکارومیسس سرویزیه سویه ایرانی با توالی ژن HXT7 ثبت شده در NCBI دارد. پلاسمید pGBKT7 برای بیان پروتئین در مخمر بسیار مناسب می باشد و از آن برای انتقال ژن HXT7 جهت بیان آن در مخمر استفاده خواهد شد. بنابراین با جداسازی و کلونینگ این ژن در وکتور بیانی مخمر و انتقال آن به مخمر می توان میزان تولید اتانول را طی تخمیر الکلی افزایش داد.
|
Researchers
|
(First Researcher)، Alireza Tarinejad (Second Researcher)
|