|
Title
|
جداسازی و همسانه سازی ژن کاهنده جیوه معدنی(merA) از باکتری های مقاوم به جیوه
|
|
Type of Research
|
Article
|
|
Keywords
|
جیوه معدنی، زیست پالایی میکروبی، ژن merA، همسانه سازی
|
|
Abstract
|
مقدمه: بعضی از باکتری ها با داشتن ژن merA کد کننده آنزیم کاهنده جیوه معدنی، توانایی ژنتیکی بالقوه ای در حذف جیوه از طریق احیای جیوه معدنی و تبدیل آن به فرم گازی و در نتیجه پاکسازی منطقه آلوده دارند. هدف این مقاله جداسازی ژن merA از باکتری های مقاوم به جیوه و همسانه سازی آن در وکتور بیانی مناسب به منظور طراحی وکتور پایه ای برای تولید این آنزیم در باکتری و استفاده از آن برای پاکسازی محیط زیست می باشد.
مواد و روش ها: تعدادی از باکتری های موجود در مناطق آلوده به جیوه جهت جداسازی ژن merA انتخاب شدند. واکنش زنجیره ای پلیمراز به منظور جداسازی و همسانه سازی ژن merA با استفاده از آغازگرهای اختصاصی بر روی ژنوم چهار باکتری Klebsiella pneumoniae، Pseudomonas aeruginosa، Serratia marcescens و Escherichia coli انجام شد. قطعات تکثیری در وکتور بیانی pET21a+، همسانه سازی شده و به روش شوک حرارتی به باکتری های مستعد E. coli TOP10 تراریزش شدند. خوشه بندی ژن کلون شده با ژن های موجود از این نوع در NCBI با استفاده از نرم افزار MEGA ویرایش 4 انجام گرفت و در نهایت برای توالی آنزیم پیش بینی شده، بررسی های بیوانفورماتیکی انجام شد.
نتایج: ژن merA با طول 1686 جفت باز از باکتری های K. pneumoniae و E. coli جداسازی شد. وکتورهای نوترکیب به روش های مختلف مورد تایید قرار گرفتند و در نهایت با انجام توالی یابی صحت کار تائید شد. نتایج خوشه بندی نشان از شباهت بالای این ژن با ژن آنزیم کاهنده جیوه معدنی K. pneumoniae و E. coli در NCBI دارد. بحث و نتیجه گیری: وجود ژن merA در باکتری های سازگار به مناطق آلوده به جیوه به عنوان یکی از عوامل مقاومت محسوب می شود که با همسانه سازی این ژن در وکتور حاوی پروموتور بیانی و انتقال آن به باکتری ها، قادر به ایجاد و یا افزایش توانایی باکتری های حساس در حذف مقادیر بالای جیوه خواهیم بود.
|
|
Researchers
|
Parisa Khoshniat (First Researcher)، Alireza Tarinejad (Second Researcher)، Mohammad Pazhang (Third Researcher)
|