|
Title
|
بهینه سازی کدون و همسانه سازی ژن پروکیموزین گاوی برای بیان
مناسب در گیاه توتون
|
|
Type of Research
|
Article
|
|
Keywords
|
آنزیم لخته کننده شیر،
ترجیح کدونی،
کیموزین نوترکیب،
ناقل بیانی
|
|
Abstract
|
آنزیم کیموزین گاوی یکی از آنزیمهای رایج مورد استفاده در صنعت لبنیات میباشد. تهیه این
آنزیم از منبع طبیعی آن جوابگوی نیاز این صنعت عظیم نمیباشد. تولید کیموزین گاوی
نوترکیب در گیاهان میتواند یک جایگزین مناسب برای تهیه این آنزیم باشد. درج و بیان ژنهای
خارجی در گیاهان میتواند در اندامک هسته و کلروپلاست انجام گیرد. میزان بیان ژن خارجی
در میزبانهای هترولوگ یوکاریوت را میتوان با بهینهسازی کدونهای آن و همچنین سوق
دادن پروتئین هترولوگ بعد از بیان به اندامکهای محصور شده از قبیل کلروپلاست افزایش داد.
در این تحقیق، بهینهسازی کدونهای ژن پروکیموزین گاوی طوری انجام گرفت که همزمان
این CAI برای بیان در هسته و کلروپلاست گیاه توتون مناسب باشد. پس از بهینهسازی، شاخص
0 بدست آمد. توالی بهینه شده این / 0 و 947 / ژن برای اندامک هسته و کلروپلاست به ترتیب 929
سوار شده، و از طریق توالییابی تایید شد. pUC ژن پس از سنتز مصنوعی روی ناقل پایه 57
و آزمایش لخته شدن شیر تایید گردید. E. coli عملکرد ژن سنتز شده از طریق بیان در باکتری
برای تهیه ناقل بیانی مناسب برای انتقال ژن به ژنوم هسته گیاهان، ژن پروکیموزین در ناقل بیانی
گردید. این ناقل برای انتقال ژن به روش تفنگ ژنی GFP جایگزین ژن p35S-TP-GFP
مناسب بوده و با دارا بودن پپتید نشانه کلروپلاستی، باعث تجمع پروتئین در کلروپلاست میشود.
که برای انتقال ژن به روش آگروباکتریوم مناسب است، ،pBI همچنین، این ژن در ناقل 121
شد. ناقلهای نوترکیب ساخته شده در این تحقیق میتوانند برای انتقال و GUS جایگزین ژن
بیان مؤثر این آنزیم صنعتی در گیاهان بکار گرفته شود.
|
|
Researchers
|
Shahnam Azizi-Dargahlou (First Researcher)، Mohammad Ahmadabadi (Second Researcher)، Rana valizadeh kamran (Third Researcher)
|