عنوان
|
اثر حذف دمین شبه Ig بر روی خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه شده
|
کلیدواژهها
|
بازده کاتالیتیکی ، دمین شبهIg ،AaCel9A ، سلولاز، دمین کمکی، اندوگلوکاناز
|
چکیده
|
سلولازها متعلق به ابرخانوادهی گلیکوهیدرولازها است که هیدرولیز سلولاز را با پیوند بتا- 1
سلولازها آنزیمهای چند واحدی هستند که در قسمتهای مختلف صنعتی، به ویژه در تولید سوخت زیستی از بیومس عمده
و تجدید پذیر سلولز، کاربردهای زیادی دارند. دمینهای کمکی سلولازها، ویژگیهای عملکردی دمین کاتالیتیکی تحت تاثیر
قرار میدهند، بنابراین شناخت عملکرد دمین های تشکیل دهنده و تعیین ارتباط نسبی آن با فعالیت آنزیمی برای مهندسی
به صورت گستردهای در ابرخانوادهی Ig سلولازهایی با فعالیت و پایداری بالا سودمند میباشد. دمین کمکی شبه
از Cel9A ناشناخته است. آنزیم AaCel9A گلیکوهیدرولازها حضور دارد که نقش آن در بعضی از آنزیمها نظیر اندوگلوکاناز
یک مونومر 537 آمینواسیدی میباشد که 85 آمینواسید اول دمین شبه (AaCel9A)Alicyclobacillus acidocaldarius باکتری
و بقیه دمین کاتالیتیکی را تشکیل میدهد. به جز شبیه سازیهای مولکولی، تاکنون هیچ گزارش آزمایشگاهی در مورد نقش Ig
بدون AaCel9A در این آنزیم مطرح نشده است. در این مطالعه ابتدا ناقل بیانی حاوی توالی رمز کننده آنزیم Ig دمین شبه
و pH خصوصیات بیوشیمیایی نظیر ، Ig به میزبان بیانی منتقل گردید. بعد از بیان و تخلیص آنزیم فاقد دمین شبه Ig دمین شبه
دمای بهینه و پارامترهای سینتیکی آن تعیین و با اطلاعات مربوط به آنزیم نوع وحشی مقایسه شد. نتایج نشان می دهد که
آنزیم ایجاد نکرده است اما در مقابل، بازده کاتالیتیکی را حدود سه برابر Km تغییر قابل توجهی را در Ig حذف دمین شبه
تغییر کرده است. Ig فعالیت بهینه آنزیم در اثر حذف دمین شبه pH افزایش داده است. علاوه براین، دما و
|
پژوهشگران
|
فرشته سادات یونسی (نفر اول)، محمد پاژنگ (نفر دوم)، یعقوب پاژنگ (نفر سوم)، سعید نژاوند (نفر چهارم)، پرستو رحیمی زاده (نفر پنجم)، محسن اکبریان (نفر ششم به بعد)، مهرناز حقی (نفر ششم به بعد)
|