مشخصات پژوهش

عنوان	کلونینگ و بیان cDNA گرانزیمM و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آن
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	آپوپتوز، گرانزیمM، ،کازئین، فعالیت پروتئازی، انکلوژن بادی
چکیده	تعادلبینحیات ومرگسلولی تحتکنترلژنتیکیاست.علائمخارجسلولیومیانجی گرهایداخلسلولیدرحفظاینتعادلدرگیرهستند.وقتیسلول هاتحتتاثیرآسیببیولوژیکی،بیوشیمیاییوبیوفیزیکیقرارمی گیرند،گروهیازژن هایپاسخ دهندهبهتنشبیانودرنتیجه یآن، آپوپتوزیامرگبرنامه ریزیشده یسلولیآغازمی گردد. دفاع در مقابل عفونت های ویروسی و سلول های توموری، به عملکرد لنفوسیت های T سلول کش و سلول های کشنده-ی طبیعی وابسته است. گرانزیمM یکی از اعضای خانواده ی سرین-پروتئازهاست که اساسا در این سلول ها بیان می-گردد.به نظر می رسد که گرانزیمM یک القاکننده ی بالقوه ی مرگ در سلول های توموری هدف باشد و ویژگی های ریخت شناسی منحصر به فردی را در مقایسه با سایر گرانزیم ها ایجاد می کند. با وجودی که cDNA گرانزیمM در اوایل سال 1990 کلون شده است، اما این گرانزیم چندین سال است که به عنوان یک گرانزیم ناشناخته باقی مانده و فقط در طی چند سال گذشته به این پروتئاز توجه بیش تری شده است. بنابراین در این مطالعه cDNA گرانزیمM کلون و بیان گردید. انکلوژن بادی های حل شده با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی نیکل-آگارز خالص گردیدند و همزمان ساختار طبیعی خود را به دست آوردند. فعالیت گرانزیمM با استفاده از سوبسترای کازئین سنجیده شد و فعالیت پروتئازی آن توسط افزایش جذب در طول موج 280 نانومتر به واسطه ی تجزیه ی کازئین بررسی گردید. نتایج به دست آمده از این مطالعه نشان می دهد که پروتئین خالص شده از لحاظ زیستی فعال می باشد.
پژوهشگران	نرگس خازه (دانشجو)، محمد پاژنگ (استاد راهنما)، فرامرز مهرنژاد (استاد راهنما)، نادر چاپارزاده (استاد مشاور)