عنوان
|
طراحی و ساخت یک پلاسمید عرضه سطحی حاوی قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 نوترکیب ویروس پاپیلومای انسانی تیپ 18 جهت بیان در مخمر Yarrowia lipolytica
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپ شده
|
کلیدواژهها
|
پروتئین E6 نوترکیب پلاسمید عرضه کننده در سطح تیپ 18 ویروس پاپیلومای انسانی همسانه سازی
|
چکیده
|
قدمه: ویروس های پاپیلومای انسانی (HPV) با بیش از 100 تیپ، به دو دسته با ریسک پایین و بالا تقسیم می شوند که تیپ های 16 و 18 به تنهایی در 70% موارد سرطان گردنه رحم دخیل اند. در حال حاضر، توسعه پروتئین های نوترکیب HPV با هدف واکسیناسیون یا درمان مورد توجه دانشمندان می باشد. از این رو، مطالعه حاضر با هدف ساخت یک پلاسمید نوترکیب عرضه کننده در سطح رمزگذار پروتئین E6 ویروس پاپیلومای انسانی تیپ 18 انجام شد.
روش کار: قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 تیپ 18 ویروس پاپیلومای انسانی (HPV18) با استفاده از DNA فرد مبتلا به ویروس به عنوان الگو، با روش PCR آشیانه ای مورد تکثیر قرار گرفت و پس از برش آنزیمی دوگانه Hind III و SfiI، به درون پلاسمید عرضه کننده در سطح pINA1317-YLCWP110 همسانه سازی شد.
یافته ها: روش های مولکولی نظیر PCR و برش آنزیمی دوگانه صحت همسانه سازی پلاسمید نوترکیب pINA1317-YLCWP110-E6 را مورد تأیید قرار داد. همچنین، نتایج به دست آمده از تعیین توالی به روش سنگر و همردیفی با داده های موجود در بانک ژن منجر به تأیید نهایی صحت توالی، ترادف و چارچوب قرار گرفتن قطعه ژنی در جایگاه مناسب گردید.
نتیجه گیری: نتایج این مطالعه، همسانه سازی موفق قطعه ژنی رمزگذار پروتئین E6 ویروس HPV18 را در پلاسمید عرضه کننده در سطح pINA1317-YLCWP110-E6 در جایگاه و جهت مناسب مورد تأیید قرار داد. این پلاسمید در صورت بیان در میزبان مخمری Yarrowia lipolytica، قابلیت استفاده به عنوان واکسن، مارکر مولکولی یا جنبه درمانی خواهد داشت.
|
پژوهشگران
|
محدثه کوهی چاپان (نفر اول)، سولماز منیری جواد حصاری (نفر دوم)، فرشاد درویشی (نفر سوم)، کاترین مدزاک (نفر چهارم)
|