مشخصات پژوهش

عنوان	دخالت متالوپروتئین MSD1 در مکانیسم مقاومت به شوری بوسیله میانکنش با SOS3
نوع پژوهش	مقاله چاپ شده
کلیدواژه‌ها	سیستم دوبل هیبرید مخمر، SOS3، شوری، منگنز سوپر اکسید دسموتاز، GST-Pull Down
چکیده	در بین تنش های مختلف، تنش شوری تهدید بزرگی برای گیاه محسوب می شود و مطالعه مکانیسم تحمل شوری در گیاه حائز اهمیت است. در یکی از مسیرهای تحمل شوری در گیاه مدل آرابیدوپسیس، پروتئین Salt Overly Sensitive3 (SOS3) که یک حسگر یونهای کلسیم و آغازگر مسیر تحمل شوری است با تشکیل کمپلکس SOS3-SOS2 موجب فعال سازی فرایندهای مختلف به منظور تحمل شوری می شود. از سوی دیگر، رادیکال های سوپراکسید که در تنش های مختلف ازجمله تنش شوری تولید می شود برای سلول مضر بوده و بایستی از بین بروند. چگونگی حذف این رادیکالهای سوپراکسید و حفظ سلول از آسیب های اکسیداتیو در گیاهان مقاوم به شوری مشخص نیست. در این تحقیق، با کارگیری تکنیک Yeast Two Hybrid System (Y2HS) و دوبل تراریزش مخمر Saccharomyces cerevisiae سویه AH109 با وکتورهای pGBT9-SOS3 و pGADT10-AtcDNA میانکنش های پروتئینی SOS3 در میان کتابخانه cDNA آرابیدوپسیس جستجو گردید. از چهار کلنی بدست آمده در روی محیط کشت انتخابی SD-AHWLاستخراج DNA انجام و پس از تکثیر وکتور pGADT10-AtcDNA آنها در E. coli توالی یابی صورت گرفت و در بانک اطلاعات آرابیدوپسیس BLAST شد. یکی از مهمترین میانکنش های یافت شده مربوط به پروتئین Manganese Superoxide Dismutase 1 (MSD1) بود. MSD1 واکنش خنثی سازی رادیکال-های سوپراکسید برای حفاظت گیاه از آسیب های اکسیداتیو ناشی از استرس ها را به عهده دارد. میانکنش و بکارگیری MSD1 توسط SOS3 در مسیر مقاومت به شوری موجب نجات گیاه از آسیب های اکسیداتیو می شود. در ادامه، میانکنش SOS3-MSD1 با جداسازی و همسانه سازی cDNA کامل MSD1 در وکتورهای دوبل هیبرید مخمر تایید شد. همچنین به کمک تکنیک GST-Pull Down نشان داده شد که پروتئین SOS3 تولید شده در باکتری از روی pGEX2TK-SOS3 و پروتئین نشاندار MSD1تولید شده از روی pGBKT7-MSD1 بصورت مستقیم باهم میانکنش دارند. این اولین گزارش از برهمکنش مسیر تحمل به شوری (SOS3) با مسیر حذف یونهای مضر سوپراکسید (MSD1) می باشد که مکانیسم مولکولی این دو مسیر را بهم مرتبط می سازد.
پژوهشگران	مینا خواجه دهی (نفر اول)، مقصود پژوهنده (نفر دوم)، فاطمه محمودی کردی (نفر سوم)