عنوان
|
همسانه سازی و بررسی فیلوژنتیکی توالی های دو ژن متعلق به زیر خانواده کریپتوکروم DASH جلبک Volvox carteri
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپ شده
|
کلیدواژهها
|
همسانه سازی وکتوربیانی گیرنده های نوری اپتوژنتیک
|
چکیده
|
در اکثر موجودات، گیرنده های نوری پیام رسانی به منظور درک و تفسیر علائم محیطی به وجود آمده اند. این مولکول ها قادرند، نور را توسط کروموفورهای خود جذب کرده، مسیرهای پیام رسانی خاصی را در سلو ل ها به راه انداخته و سبب بروز پاسخ مناسب در سلول شوند. شاخه جدیدی از علم به نام اپتوژنتیک تلاش می کند تا از گیرنده های نوری به عنوان ابزارهای مولکولی جهت کنترل دقیق وقایع سلولی استفاده کند. یکی از راه های توسعه اپتوژنتیک، شناسایی ابزارهای مولکولی جدید دارای خصوصیات ویژه می باشد. بدین منظور تعیین خصوصیات ژن های پیش گویی شده ای که اورتولوگ گیرنده های نوری شناسایی شده می باشند، بسیار مفید خواهد بود. در پروژه تعیین توالی ژنوم Volvox carteri دو ژن پیش گویی شده متعلق به خانواده ی Cryptochrome/Photolyase شناسایی شد. هدف از این مطالعه، جداسازی توالی های کدکننده ی این دو ژن، همسانه سازی دو ژن مذکور در داخل وکتور بیانی و تعیین موقعیت قالب خواندن باز آن ها در خانواده کریپتوکروم/فتولیاز می باشد. بدین منظور، جلبک V.carteri تحت شرایط بهینه رشد داده شد. سپس با استفاده از تکنیک RT-PCR توالی های کدکننده ی این دو ژن تکثیر شد. با استفاده از تکنیک مهندسی ژنتیک قطعات تکثیر شده وارد وکتور بیانی pGEX2TK گردید. به منظور همسانه سازی وکتور نوترکیب، پلاسمیدها وارد باکتری Escherichia coli گردیدند و سپس تعیین توالی شدند. نتیجه پژوهش نشان داد که توالی های ثبت شده در پایگاه داده ای NCBI به عنوان توالی mRNA برای دو ژن کریپتوکروم DASH، با توالی آن ها در ولوکس تفاوت هایی را نشان می دهد.
|
پژوهشگران
|
سعید مهدوی (نفر اول)، جعفر رازقی (نفر دوم)، مقصود پژوهنده (نفر سوم)، آرش کیانیان (نفر چهارم)، علی موافقی (نفر پنجم)، مرتضی کوثری نسب (نفر ششم به بعد)
|