عنوان
|
فعالیت مهارکنندگی اسانس سه گیاه روی آنزیم استیل کولین استراز لارو سوم کرم غوزه پنبه Helicoverpa armigera (Lepidoptera, Noctuidea)
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه شده
|
کلیدواژهها
|
کرم غوزه پنبه، فعالیت مهارکنندگی آنزیم، گیاهان دارویی
|
چکیده
|
استیل کولین استراز (AChE) یک آنزیم حیاتی در حشرات است که انتقال دهنده عصبی استیل کولین را در سیناپس های کولینرژیک هیدرولیز می کند. نقش کلیدی در تنظیم انتقال تکانه های عصبی دارد و هدف مهمی برای بسیاری از حشره کش ها است. اسانس های استخراج شده از گونه های مختلف گیاهی به دلیل پتانسیل خود به عنوان مهار کننده های استیل کولین استراز (AChE) شناخته شده اند که می تواند در کنترل آفات مفید باشد. در این مطالعه، ما فعالیت مهارکنندگی استیل کولین استراز (CHE) اسانس های Salvia rosmarinus (Lamiaceae) ، Artemisia persica (Asteraceae) و Origanum majorana (Lamiaceae) را بررسی کردیم. کل بدن لاروهای سن سه هموژنیزه شده و سپس با سرعت 10000 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد سانتریفیوژ شد. مایع رویی به عنوان منبع آنزیم استفاده شد. برای اندازه گیری فعالیت آنزیم استیل کولین استراز از کیت تشخیصی مخصوص (Biorexfars®-Iran) استفاده شد. این کیت شامل دو معرف R1 و R2 می باشد. اولین معرف حاوی بافر پیروفسفات pH7.6 (75 میلی مول در لیتر) و هگزاسیانوفرات پتاسیم (2.0 میلی مول در لیتر) است. معرف دوم حاوی یدید s-Butyrylthiocholine (15 mmol/l) است که بستر واکنش است و به نسبت 5 به 1 (R1 به R2) استفاده می شود. برای بررسی اثر بازدارندگی اسانس های گیاهی، 960 میکرولیتر بافر و 60 میکرولیتر نمونه آنزیمی از لارو کرم غوزه پنبه در لوله آزمایش مخلوط و در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه انکوبه شدند. سپس جذب نمونه در طول موج 405 نانومتر با استفاده از دستگاه الایزا ریدر اندازه گیری شد. سپس 200 میکرولیتر سوبسترا (R2) به محلول اضافه شد و میزان جذب مجدداً اندازه گیری شد. تفاوت بین دو قرائت جذب نشان دهنده فعالیت آنزیم استیل کولین استراز در نمونه ها است. با مقایسه فعالیت در نمونه شاهد و بازدارنده می توان میزان بازدارندگی را محاسبه کرد. نتایج حاکی از آن است که غلظت 10 درصد اسانس A. persica قوی ترین اثر بازدارندگی و غلظت 2.5 درصد اسانس O. majorana کمترین اثر بازدارندگی را داشت. علاوه بر این، تفاوت قابل توجهی در اثرات بازدارندگی بین غلظت 2.5% S.rosmarinus و غلظت 5% O. majorana وجود نداشت. در این مطالعه ما گیاهان دارویی معطری را انتخاب کردیم که اثرات بازدارندگی قابل توجهی از خود نشان دادند. اما برای درک ک
|
پژوهشگران
|
ساناز گلزار (نفر اول)، رضا فرشباف پورآباد (نفر دوم)، داود محمدی (نفر سوم)، اکرم حاتمی (نفر چهارم)
|