عنوان
|
جداسازی و شناسایی قارچ های همراه علایم لکه برگی درختان جنگلی در منطقه ارسباران
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
کلیدواژهها
|
بیمارگر گیاهی، بیمارگر قارچی، تاکسونومی، فیلوژنی
|
چکیده
|
نمونه برداری از برگ های دارای علائم لکه برگی درختان جنگل های مناطق ارسباران انجام خواهد شد. پس از جمع آوری نمونه ها، نمونه ها برای انجام مراحل بعدی تحقیق به آزمایشگاه منتقل خواهد شد.
برای جداسازی قارچ های همراه لکه برگی، ابتدا نمونه های گیاهی شست و شوی سطحی خواهند شد. سپس نمونه ها به قطعات کوچکی برش داده خواهند شد. نمونه های برش داده شده ضدعفونی سطحی شده، سپس آب گیری و خشک خواهند شد. به منظور کشت، بافت های گیاهی در داخل تشتک های پتری حاوی کاغذ صافی استریل مرطوب قرار داده خواهند شد و تشتک ها بمدت یک الی دو هفته در دمای اتاق در شرایط تاریکی نگهداری خواهند شد. در فاصله های 7، 14 الی 21 روز پس از کشت، نمونه ها جهت رشد یا عدم رشد اندام های قارچی بررسی خواهند شد. در صورت رشد اندام های قارچی روی نمونه های گیاهی، این اندام ها به محیط کشت آب - آگار (WA) حاوی آنتی بیوتیک منتقل خواهند شد. پس از 2 – 1 روز، اقدام به خالص سازی جدایه های قارچی روی محیط-کشت PDA خواهد شد. جهت نگه داری طولانی مدت جدایه های قارچی از روش نگه داری قارچ روی کاغذ صافی استفاده خواهد شد. شناسایی ریخت شناسی گونه ها: از کشت های خالص برای شناسایی قارچ ها استفاده خواهد شد. شناسایی براساس ویژگی های ریخت شناختی قارچ ها روی محیط-های کشت، و با استفاده از کلیدهای استاندارد قارچ شناسی انجام خواهد شد.
شناسایی مولکولی قارچ ها: در مواردی که قارچ های جداسازی شده قادر به اسپورزایی نباشند و یا از طریق ریخت شناسی شناسایی آن ها ممکن نباشد، از روش مولکولی براساس توالی یابی برخی نواحی ژنومی از جمله ناحیه rDNA-ITS برای شناسایی و تعیین وضعیت تاکسونومیکی استفاده خواهد شد. شناسایی مولکولی براساس تعیین توالی برخی نواحی ژنومی انجام خواهد شد
|
پژوهشگران
|
کبری عظیم زاده عربشاه خان (دانشجو)، اکبر شیرزاد (استاد راهنما)، علیرضا علیزاده (استاد راهنما)، عبدالله احمدپور (استاد مشاور)
|